促紅細(xì)胞生成素對(duì)缺氧缺血性腦病新生兒血清SOD,NO水平的影響

【關(guān)鍵詞】  促紅細(xì)胞生成素； 缺氧缺血性腦病； 超氧化物歧化酶； 氧化亞氮

缺氧缺血性腦病（hypoxic�瞚schemic encephalopathy，HIE）是導(dǎo)致新生兒死亡和致殘的重要原因。由于HIE的發(fā)病機(jī)理是多因素的、復(fù)雜的，其治療迄今尚無滿意的措施，因此，積極探索一套完整、合理、有效的治療方案是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。近年來，促紅細(xì)胞生成素(erythropoietin，EPO)的非造血作用逐漸被認(rèn)識(shí)［1］，有關(guān)EPO在神經(jīng)系統(tǒng)中的作用已受到重視。國(guó)內(nèi)外在腦損傷動(dòng)物模型及治療腦損傷的初步研究中均顯示EPO有神經(jīng)保護(hù)作用［1-3］，氧化亞氮（NO）是一種活性很強(qiáng)的自由基, 與O2構(gòu)成氧化還原對(duì)，形成活性更強(qiáng)的氧化劑, 具有更大的潛在毒性［4］。SOD 為氧自由基的清除劑，對(duì)于保護(hù)機(jī)體免受自由基損傷起重要作用。因此測(cè)定SOD和NO含量對(duì)HIE療效觀察具有重要意義。本文通過觀察EPO治療HIE前后SOD,NO水平的變化,探討EPO在HIE患兒機(jī)體中的抗氧化作用, 為HIE的治療提供新的依據(jù)。

    1  對(duì)象與方法

    1.1  對(duì)  象

    選擇2006年3月～2008年2月入住我院的HIE患兒，診斷及分度參照HIE診斷標(biāo)準(zhǔn)和臨床分度標(biāo)準(zhǔn)［5］。納入本研究病例符合下列條件：①入院日齡≤24小時(shí)，出生體質(zhì)量≥2 500 g的足月新生兒。②無嚴(yán)重先天畸形，如膈疝、腦發(fā)育不全。③無大量顱內(nèi)出血、無嚴(yán)重呼吸道阻塞性疾病、無貧血。將符合入選條件的62例HIE患兒隨機(jī)分為兩組。治療組32例，胎齡（39.52±1.12）周，出生體質(zhì)量（3 240±361）g。其中，男性17例，女性15例，輕度HIE 18例，中度HIE 8例，重度6例。觀察組30例，胎齡（39.97±1.27）周，出生體質(zhì)量（3215±324）g，男性16例，女性14例。其中，輕度15例，中度9例，重度6例。兩組間一般情況差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），同時(shí)選取同一時(shí)期本院正常陰道分娩的健康足月兒40例作為正常對(duì)照，其胎齡、出生體質(zhì)量、性別與HIE組間差異也無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

    1.2  治療方法

    兩組HIE患兒常規(guī)治療均根據(jù)新生兒HIE治療方案進(jìn)行對(duì)癥和支持治療。治療組于出生后第2天，給予EPO（南京華欣制藥公司生產(chǎn)，批號(hào)20021024），按每日200 U/kg，靜脈滴注，連續(xù)用藥７天。

    1.3  檢  測(cè)

    1.3.1  標(biāo)本采集  兩組HIE患兒均于出生后第1天及第8天（即EPO治療前后），分別采取股靜脈血3 ml，同時(shí)采取正常對(duì)照新生兒股靜脈血3 ml，3 000 r/min離心5 min后，取上清液分裝并冷凍于-20 ℃冰箱保存待測(cè)。

    1.3.2  檢驗(yàn)方法及內(nèi)容  ①SOD測(cè)定采用黃嘌呤氧化酶法，NO測(cè)定采用硝酸還原酶比色法。SOD,NO試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供。②兩組HIE患兒治療后檢查血紅蛋白（Hb）、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（Ret）、血小板計(jì)數(shù)（PLT）、血電解質(zhì)、血糖及肝腎功能。

    1.4  統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    所得數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，組間比較采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2  結(jié)  果

    急性期HIE患兒血清中SOD,NO水平與正常對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

    中、重度HIE患兒急性期血清中的SOD,NO水平與輕度HIE患兒比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。  輕度HIE患兒應(yīng)用EPO治療后血清中SOD,NO水平與治療前比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），中、重度HIE患兒應(yīng)用EPO治療后血清中SOD,NO水平與治療前比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而觀察組患兒在常規(guī)治療后血清中SOD,NO水平與治療前比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。表1  HIE組和對(duì)照組新生兒血清SOD,NO水平比較 表2  EPO治療前后血清SOD,NO水平比較教學(xué)論文發(fā)表

    EPO對(duì)其他系統(tǒng)的影響，結(jié)果見表3。治療組和觀察組HIE患兒治療后Hb,Ret,PLT比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），也無明顯肝腎功能損害及電解質(zhì)紊亂。 表3  兩組HIE患兒治療后Hb,Ret,PLT比較

    3  討  論

    促紅細(xì)胞生成素是主要由腎臟合成和分泌的受氧調(diào)節(jié)的一種糖蛋白激素，還廣泛分布于腦、肺、脾等部位。其分泌不依賴于其在血液中濃度的變化，而是在基因水平受到缺氧調(diào)控，當(dāng)組織環(huán)境低氧時(shí)，EPO基因轉(zhuǎn)錄和表達(dá)增強(qiáng)［5］。近年來，大量實(shí)驗(yàn)研究顯示，EPO有直接的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)和保護(hù)作用；另一方面能促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的成熟和存活，使血管再生更多的紅細(xì)胞轉(zhuǎn)移到缺氧缺血組織，減輕局部缺氧造成的損害以及通過促進(jìn)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的成熟與分化，減少神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的凋亡，起到間接的神經(jīng)保護(hù)作用［6］。其作用機(jī)制可能是:①減輕興奮性氨基酸的細(xì)胞毒性；②抑制NO過度合成；③抑制脂質(zhì)過氧化物的產(chǎn)生，從而減輕炎癥反應(yīng)；④直接抗氧化作用。

 SOD是體內(nèi)重要的自由基清除劑，其活性高低反映了機(jī)體對(duì)氧自由基的清除能力。HIE患兒腦缺氧缺血再灌注過程中，氧自由基大量產(chǎn)生，SOD則被大量消耗，活性明顯下降。NO是一種氧自由基性質(zhì)的活性分子，是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的生理信使，缺氧缺血時(shí)過量的NO與超氧陰離子反應(yīng)形成毒性更大的過氧化陰離子，對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生很強(qiáng)的毒性作用，從而加重腦缺血-再灌注損傷導(dǎo)致神經(jīng)元壞死［7］。有資料表明，新生鼠缺氧缺血后24小時(shí)NO大量釋放［8］，因此測(cè)定SOD,NO含量可作為早期診斷HIE較靈敏指標(biāo)之一，同時(shí)對(duì)HIE的治療、病情程度及預(yù)后的判斷有重要意義［9］。

    本研究顯示，HIE患兒急性期血清中SOD濃度較正常對(duì)照組明顯下降，而NO水平則明顯升高（P＜0.05，表1）。其原因可能是缺氧缺血導(dǎo)致腦組織損傷，產(chǎn)生大量超氧陰離子，使SOD消耗較大，從而加劇了腦組織損傷。同時(shí)我們的觀察還發(fā)現(xiàn)，中、重度HIE與輕度HIE患兒血清中SOD,NO濃度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（表2），說明患兒血清中SOD,NO水平高低可反映HIE的病情程度。另外從表3也可以看出，輕度HIE患兒在應(yīng)用EPO治療前后血清中SOD,NO水平變化無明顯差異（P＞0.05），而中、重度HIE 患兒應(yīng)用EPO治療后，血清中SOD濃度有明顯升高，NO濃度明顯下降（P＜0.05），說明應(yīng)用EPO治療中、重度HIE患兒，能產(chǎn)生直接的抗氧化作用，同時(shí)能抑制NO引起的過度炎癥反應(yīng)。

    有研究報(bào)道［6］，EPO治療新生兒HIE會(huì)引起Hb,Ret,PLT顯著升高。本研究未發(fā)現(xiàn)治療組應(yīng)用EPO后Hb,Ret,PLT明顯升高（P＞0.05，表3），可能與（1）入選病例均為足月兒，（2）EPO的治療劑量和時(shí)間長(zhǎng)短等因素有關(guān)，本組患兒也無肝腎功能損害和電解質(zhì)紊亂。因此，EPO對(duì)新生兒HIE具有神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)和神經(jīng)保護(hù)作用，有助于早期神經(jīng)功能的恢復(fù)，且無明顯不良反應(yīng)，但其遠(yuǎn)期效果如何，有待進(jìn)一步隨訪觀察。

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