脈絡膜新生血管促進因子的研究進展

【摘要】  脈絡膜新生血管(choroidal neovascularization，CNV)是危害視力的主要病變之一，為多種眼底疾病的最終結局，最終導致嚴重的視力喪失。脈絡膜新生血管的產生與促進與血管內皮生長因子與促血管生成素有著密切的關系，我們就這兩種細胞因子的來源與作用的研究進展進行綜述。

【關鍵詞】  脈絡膜新生血管;血管內皮生長因子;促血管生成素

　　AbstractChoroidal neovascularization(CNV) is the important reason for a series of fundus oculi diseases which usually lead to vision loss. The forthing and developing of the CNV are regulated and controlled mainly by vascular endothelial growth factor(VEGF) and angiopoietin��1/2. So we summarize the advance of research on the causation and the effect of the two factors.

　　�rKEYWORDS： choroidal neovascluarization;vascular endothelial growth factor;angiopoietin��1/2

    　0引言

　　脈絡膜新生血管(choroidal neovascluarization, CNV)與許多眼底病有關，常最終致視力的喪失。CNV形成的具體機制目前尚未完全明了，現就其產生與促進生成的主要細胞因子VEGF與Ang的研究進展情況做一綜述。

　　1血管內皮生長因子教師職稱論文發表

　　1.1血管內皮生長因子來源及其家族 血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)是一種自分泌型堿性蛋白，CNV模型研究發現VEGF起源于巨噬細胞、RPE細胞、微血管內皮細胞、周細胞等，其中巨噬細胞是最主要來源[1]。不同形式的基因連接形成4種主要的同源多肽，分別由121，165，189，206個氨基酸組成，含有共有序列，不同形式的多肽連接方式決定它們與受體相關結構的相互作用能力[2]。后又發現一個新的變異連接家族，命名為VEGF×××b[3]，具有末端外顯子8點，使得表達出的蛋白具有相同的長度，但是有不同C�材┒税被�酸序列。受體連接段與二聚體段是完整的，但是對于VEGF165b，它不但并不具有刺激血管生成的作用，相反具有抑制VEGF165的促血管擴張、增殖與移行的作用，這組VEGF分子的重要性尚有待研究[4]。VEGF的受體主要包括VEGFR��1，��2和��3，VEGFR��1的生物學效應表現為誘導內皮細胞的遷移。VEGFR��2主要影響并介導VEGF�睞促有絲分裂。VEGFR��3與其特異的配體VEGF�睠，�睤結合引起內皮細胞的增殖和遷移，對胚胎發育及腫瘤的生長和轉移起重要調控作用[5]。VEGF還可與受體 NRP��1/2結合，而后者與硫酸肝素蛋白多糖能夠影響VEGFRs的活性[6]。研究表明在VEGFR��2與NRP��1共表達的細胞上，NRP��1可以增強VEGFR��2介導的信號通路的有效性，所以能結合NRP��1的VEGF�睞165比不能結合的VEGF�睞121促有絲分裂活性高，但目前還未找到結合VEGF�睞165后NRP��1/ NRP��2介導的信號通路[7]。正常視網膜同時表達VEGF的mRNA與蛋白[8]。已證實VEGF是由RPE細胞旁分泌產生的，RPE細胞向基底膜也就是脈絡膜毛細血管側分泌的VEGF是向視網膜神經層的2～7倍，在缺氧的情況下的差異會更大[9]。根據對RPE細胞中VEGF受體的研究發現，VEGF發揮作用的機制除旁分泌后，還包括自分泌方式[10]，證實RPE與脈絡膜毛細血管之間的關系是前者促進后者生成，后者缺乏前者則萎縮，這可能是脈絡膜萎縮的一個重要原因。

　　1.2 VEGF促血管生成作用及其機制的研究進展 VEGF的促血管生成作用表現在可使EC中血管通透性增高，造成血漿蛋白滲漏，具有營養EC的作用，為其生長提供條件[11]。在缺氧或炎癥等失衡狀況時作用則相反：缺氧可上調其mRNA和蛋白質表達[12]，它成為眼內新生血管的刺激因子。它誘導尿激酶型和組織型纖維蛋白溶解酶激活物的表達，同時也誘導MMPs和膠原酶的表達，促進ECM降解，利于EC移行。在VEGF轉基因鼠中VEGF mRNA和蛋白分子高水平表達，能引起CNV生成和牽拉性視網膜脫離。Leske等[13]在大鼠ROP模型中通過qRT�睵CR 可以檢測到在新生血管化過程中VEGF mRNA的表達，抗VEGF療法可明顯抑制眼內CNV產生。VEGF啟動視網膜新生血管形成的作用是血管擴張及通透性增加，然后經過血管壁基底膜酶的降解、內皮細胞的趨化與遷移有絲分裂和周細胞的相互作用，促進血管腔形成[14]。 VEGF與VEGFR結合后，VEGFR首先自磷酸化，繼而激活磷脂酰膽堿特異性磷脂酶C(PLCr)，水解磷脂酰肌醇二磷酸(PIP2)，產生二脂酰甘油(DAG)和肌醇三磷酸(IP3)，其中DAG可激活胞質中蛋白激酶C(PKC)，并固定于膜上，然后誘導內皮細胞生長，增加血管滲透性。有研究認為缺氧在新生血管形成初始可能起雙重作用。一方面是分子水平。視網膜內層缺氧引起VEGF的高表達，視網膜生成的VEGF不斷上調引起其在視網膜和玻璃體液中積聚，為新生血管形成做準備。另一方面是細胞水平，星狀細胞缺氧發生變性，其使視網膜血管附著于視網膜并保持完整的作用被破壞，視網膜血管增生或長入玻璃體，同時血管壁內皮細胞接觸玻璃體中的VEGF，則向玻璃體內生長形成微動脈瘤和視網膜前新生血管[15]。

　　2促血管生成素教師職稱論文發表

　　促血管生成素(angiopoietin，Ang)分子家族是一類由血管內皮周圍細胞分泌的糖蛋白，調控VEGF誘導的新生血管生成，其中最重要的是Ang��1與Ang��2。

　　2.1 Ang��1的促血管生成作用 人類Ang��1主要由血管旁細胞包括周細胞、血管平滑肌細胞和腫瘤細胞分泌表達[16]。Ang��1與Tie��2結合后，在VEGF等生長因子的存在下，能夠抑制內皮細胞凋亡，提高細胞存活力。Ang�瞝吸引血管周細胞和內皮平滑肌細胞聚集并相互作用，從而增強血管內皮細胞間連接從而有利于維持血管壁完整，促進血管重塑、成熟并在血管生成過程中促進出芽及分支的作用[17]。缺乏Ang��1基因表達的小鼠其胚胎血管發育異常[18]，血管網生成簡單血管重塑缺陷，管徑無明顯區別，且周細胞缺如，膠原纖維樣細胞分散，纖維絲短縮，而這些是維持血管穩定的關鍵因素。9d就出現心臟發育缺陷，心室內僅有內皮細胞襯而缺少心肌小粱，12d出現胚胎死亡。過度表達Ang��1的轉基因小鼠，血管管腔增大，血管基底膜連接更為完整，這提示Ang��1可能增加血管管徑而不增加萌出分支，Ang��1與VEGF協調互補，VEGF誘導血管內皮細胞增殖形成管腔，Ang��1則增強細胞間的連接、穩定血管壁的完整。Ang��1還可以通過細胞整合素發揮作用引起細胞遷移。Kim等[19]證實Ang��1可以誘