帕金森病模型大鼠杏仁基底外側核神經元電活動的研究

【摘要】  　　目的 觀察單側黑質紋狀體通路毀損后杏仁基底外側核(basolateral nucleus of amygdala, BLA)投射神經元電活動的變化。方法 應用6-羥多巴胺單側毀損黑質致密部建立帕金森病(Parkinson�餾 disease, PD)大鼠模型。采用玻璃微電極細胞外記錄法，記錄BLA投射神經元的電活動。結果 對照組和PD組大鼠BLA投射神經元的放電頻率分別是(0.66±0.13)Hz(0.08-2.73 Hz, n=25)和(0.46±0.1)Hz(0.08-2.34 Hz, n=24)，PD組大鼠的放電頻率較正常組降低，但無統計學差異(P>0.05)。對照組大鼠96%的BLA投射神經元呈現爆發式放電，4%為不規則放電；PD組大鼠90%的投射神經元顯示爆發式放電，10%為不規則放電。PD組大鼠BLA投射神經元的放電形式與對照組相比無明顯差異(P>0.05)。結論 帕金森病大鼠BLA投射神經元的放電頻率和放電形式未發生改變。

【關鍵詞】  帕金森病 6-羥多巴胺 杏仁基底外側核 電生理學

　　ABSTRACT: Objective  To investigate the changes in neuronal activity of projection neuron in the basolateral nucleus of amygdale (BLA) after the unilateral lesion of the nigrostriatal pathway. Methods  The rat model of Parkinson's disease (PD) was established by 6-hydroxydopamine lesion of the substantia nigra pars compacta, and then the spontaneous discharge of projection neuron of the BLA was examined with extracelluar recording methods in control and PD rats. Results  The results showed that the firing rates of projection neurons of the BLA were (0.66±0.13)Hz (0.08-2.73 Hz; n=25) and (0.46±0.1)Hz (0.08-2.34 Hz; n=24) in control and PD rats, respectively. The firing rates of the neurons in PD rats did not reach significant level compared to those of the control rats (P>0.05). In control rats, 96% of projection neurons of the BLA were discharged in bursts and 4% irregularly. In PD rats, 90% of projection neurons of the BLA had a bursting firing pattern and 10% irregularly. The distribution of firing patterns of the neurons in PD rats did not differ from that of the control rats (P>0.05). Conclusion  The present data suggest that the degeneration of the nigrostriatal pathway did not cause changes in firing rates and firing pattern of projection neurons of the BLA in the rats.快速論文發表 

　　KEY WORDS: Parkinson�餾 disease; 6-hydroxydopamine; basolateral nucleus of amygdala; electrophysiology

　　帕金森病(Parkinson�餾 disease, PD)是一種進行性的神經系統變性疾病，主要病理變化是黑質致密部(substantia nigra pars compacta, SNc)多巴胺能神經元的退行性變性，其臨床癥狀主要為靜止性震顫、肌強直和運動遲緩等。但是PD的病理改變不局限于黑質紋狀體多巴胺能系統，研究發現在PD患者和動物也有邊緣系統形態或(和)功能的變化。磁共振和尸檢發現PD患者的杏仁核和海馬的體積縮小，反映出這些結構中的神經元減少和路易氏體形成［1］。約有40%的PD病人有抑郁癥的表現，并且抑郁表現可在運動系統癥狀之前出現［2］。此外，部分患者亦有焦慮和癡呆。基底外側杏仁核(basolateral nucleus of amygdale, BLA)是邊緣系統的一個重要結構，它由興奮性的投射神經元和抑制性的中間神經元組成，BLA與情感性活動、學習與記憶等腦功能活動密切有關［3］。然而，BLA神經元的活動與帕金森病發病關系未見相關報道。因此，本研究以6-羥多巴胺(6-hydroxydopamine, 6-OHDA)損毀SNc的PD模型大鼠為對象，采用電生理學方法，觀察BLA投射神經元放電頻率和放電形式的變化。

　　1  材料與方法

　　1.1  動物和藥品

　　實驗選用健康雄性Sprague-Dawley大鼠35只，體重250-350 g，由西安交通大學醫學院實驗動物中心提供。大鼠在標準環境中飼養，室溫20-25 ℃，24 h晝夜循環光照，自由攝食飲水。預養1周后，隨機分為2組：對照組19只和PD組16只。實驗所用藥品6-OHDA、阿樸嗎啡以及地昔帕米均購自美國Sigma公司。

　　1.2  帕金森病大鼠模型的建立

　　采用6-OHDA化學性損毀SNc的多巴胺能神經元。6-OHDA溶于含0.1 g/L的抗壞血酸生理鹽水中(2 μg/μL)，用前配制，避光保存。制作帕金森大鼠模型前30 min腹腔注射地西帕明(25 mg/kg)以保護去甲腎上腺素能神經元。然后經腹腔注射水合氯醛(300 mg/kg)麻醉，將大鼠頭部固定于立體定位儀上。根據Paxinos-Watson大鼠腦定位圖譜確定右側SNc的位置：AP -5.0-5.3 mm，L 1.9-2.1 mm，D 7.2-7.4 mm［4］。將10 μL微量注射器與玻璃微電極相連，電極尖端直徑約50 μm，分兩個位點在SNc注射6-OHDA，每點2 μL(4 μg)，總量4 μL(8 μg)，注射完畢后留針5-10 min，緩慢退針。6-OHDA注射后1周，給大鼠頸部皮下注射阿樸嗎啡(0.05 mg/kg)，10 min后誘發向健側旋轉每5 min大于20轉者，表明PD模型成功，列為實驗對象［5］。

　　1.3  電生理記錄 職稱論文怎么發表 

　　電生理記錄在SNc損毀后第3周進行。大鼠經腹腔注射烏拉坦(1.2 g/kg)麻醉，行氣管插管和頸外靜脈插管術，將其頭部固定于腦立體定位儀上，依據Paxinos-Watson大鼠腦定位圖譜確定BLA的位置，坐標為：AP -2.0-2.8 mm，L 4.8-5.0 mm，D 6.5-7.4 mm［4］。采用玻璃微電極細胞外記錄法記錄BLA神