黎藥-角花胡頹子抗炎鎮(zhèn)痛活性部位實(shí)驗研究

【摘要】  　　目的：探討角花胡頹子莖葉水煎液各萃取部位的抗炎鎮(zhèn)痛作用，為進(jìn)一步尋找活性成分的研究奠定基礎(chǔ)。方法：采用二甲苯引起小鼠耳腫脹和毛細(xì)血管通透性的方法觀察角花胡頹子各萃取部位抗炎作用，采用熱板法和醋酸扭體法觀察角花胡頹子鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果：角花胡頹子乙酸乙酯萃取層、齊墩果酸能明顯的抑制小鼠耳腫脹(P<0.05)；正丁醇萃取層、齊墩果酸能抑制醋酸致小鼠毛細(xì)管通透性增加(P<0.05)；角花胡頹子各部位對小鼠痛閾與扭體反應(yīng)無明顯影響（P>0.05）。結(jié)論：角花胡頹子乙酸乙酯層、正丁醇層萃取部位為抗炎有效部位。

【關(guān)鍵詞】  角花胡頹子；抗炎；鎮(zhèn)痛

　�。跘BSTRACT］ Objective: To explore the anti�瞚nflammatory and analgesia activities of each partitioned fraction of the decoction extract of stems and leaves of Elaeagnus gonyanthes in the pursuit of its active constituents. Methods: The anti�瞚nflammatory effects of each partitioned fraction were studied on ear�瞫welling and capillary permeability models of mice induced by xylene, analgesia effects were tested on pain mice models prepared by hotplate and acetic acid. Results: Both ethyl acetate and oleanolic acid extract of Elaeagnus gonyanthes could significantly inhibit the ear�瞫welling effects (P<0.05), n�瞓utanol extract and oleanolic acid extract could prohibit the increase of capillary permeability in the studied models (P<0.05). No fraction of this plant showed significant influence on the threshold of pain and writhing response in the models (P>0.05). Conclusions: The ethyl acetate and n�瞓utanol extracts of Elaeagnus gonyanthes are effective fractions responsible for its anti�瞚nflammatory and analgesia activities.
   
　�。跭EY WORDS］ Elaeagnus gonyanthes; Anti�瞚nflammatory; Anagesia教育學(xué)論文發(fā)表 
   
　　角花胡頹子［1］（Elaeagnus gonyanthes Benth.）為胡頹子科胡頹子屬植物，別名羊母奶子、吊中子藤，假甜酸，主要分布在廣東，廣西，湖南，云南，海南等地。以根、葉、果入藥，是海南黎族地區(qū)常用藥之一，也是著名黎藥荔花鼻竇炎片的主藥。據(jù)《海南植物志》中記載，角花胡頹子具有止咳平喘、祛風(fēng)通絡(luò)、行氣止痛、消腫解毒等作用，主要治療支氣管哮喘、慢性支氣管炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腰腿痛、河豚中毒、跌打腫痛等。
   
　　目前國內(nèi)外對角花胡頹子的研究甚少, 未見有關(guān)角花胡頹子藥理作用的報道。為了促進(jìn)該植物資源的合理利用與開發(fā), 本研究將角花胡頹子粗粉水煎煮液，利用有機(jī)溶劑（氯仿，乙酸乙酯，正丁醇）進(jìn)行萃取分離，從乙酸乙酯部位獲得大量齊墩果酸，同時對各個萃取部位與分離出來的齊墩果酸進(jìn)行抗炎鎮(zhèn)痛實(shí)驗研究，以期確定角花胡頹子有效部位。本實(shí)驗結(jié)果將為進(jìn)一步深入系統(tǒng)的研究和開發(fā)角花胡頹子提供實(shí)驗依據(jù)。

　　1  材料

　　1.1  動物、藥材
   
　　取清潔級昆明種小鼠，18～22g，雌雄各半，動物合格證號：SCR（豫）2009-0019號。角花胡頹子采自海南省萬寧市，經(jīng)中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所海南分所鑒定。阿司匹林（昆明云健制藥有限公司，批號：20080884）。

　　1.2  儀器與試劑
   
　　R-205旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海申勝生物技術(shù)公司）；SHZ-D(Ⅲ)型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（鞏義市英山谷予華儀器廠）；電熱恒溫水浴鍋；智能熱板儀器；電子天平；注射器；V650紫外分光光度計（JASCO日本分光公司）。伊文思藍(lán)，石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、二甲苯和醋酸均為分析純試劑。

　　2  方法和結(jié)果論文代理發(fā)表

　　2.1  供試藥液的制備
   
　　取角花胡頹子莖葉粗粉4.5kg，水煎煮3次，第1次煎煮1.5h，第2和第3次均煮1h，過濾，合并提取液，濃縮至4.5L。依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取濃縮，得氯仿萃取層24.0g，乙酸乙酯萃取層15.0g，正丁醇萃取層13.5g。并對乙酸乙酯萃取層進(jìn)行化學(xué)成分研究，其中分離得到齊墩果酸8.52g。

　　2.2  對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響［2］
   
　　取實(shí)驗動物60只，每組10只，隨機(jī)分為6組，給藥組分別灌胃給予角花胡頹子氯仿層提取物、乙酸乙酯層提取物、正丁醇層提取物、齊墩果酸。陽性對照組灌胃給予阿司匹林0.2g·kg-1；對照組灌胃給予等容積自來水，連續(xù)給藥7d。末次給藥1h后，以20μL二甲苯涂于小鼠右耳廓兩面致炎，左耳廓作為對照，20min后脫頸椎處死小鼠，剪下兩耳，重疊在一起，用直徑4mm打孔器取耳片，稱重，以兩耳重量差表示炎癥反應(yīng)的強(qiáng)度，實(shí)驗結(jié)果用F檢驗去掉離群值，t檢驗比較各組差異。按下式計算抑制率，腫脹抑制率（%）=（給藥組兩耳片重量差 ÷ 空白組兩耳片重量差）×100%結(jié)果見表1。表1  各萃取部位對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響（略）

　　由表1可以看出：阿司匹林、齊墩果酸、角花胡頹子乙酸乙酯萃取部位能明顯抑制二甲苯所致小鼠耳腫脹(P<0.05)。2.3  對醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)管通透性亢進(jìn)的影響［2］
   
　　取實(shí)驗動物60只，隨機(jī)分為6組，每組10只，給藥組分別灌胃給予角花胡頹子氯仿層提取物、乙酸乙酯層提取物、正丁醇層提取物、齊墩果酸。陽性對照組灌胃給予阿司匹林0.2g·kg-1；對照組灌胃給予等容積自來水，連續(xù)給藥7d，末次給藥1h后各鼠均靜脈注射0.5%伊文思藍(lán)生理鹽水溶液10mL·kg-1，隨后腹腔注射0.6%醋酸0.2mL/只，20min后脫頸椎處死，剪開腹部皮膚肌肉，用5mL生理鹽水分次洗滌腹腔，吸管吸出洗滌液，3000 r·min-1離心10min，取上清液與590nm比色測定吸光度值。結(jié)果見表2。表2  各