p57kip2和p21cip1在人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)和臨床意義

【摘要】  　　目的 探討p57kip2蛋白、p21cip1蛋白在人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況及其臨床意義。方法 采用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)p57kip2、p21cip1在55例人腦膠質(zhì)瘤和10例正常腦組織中的表達(dá)。結(jié)果 在55例膠質(zhì)瘤中，p57kip2蛋白陽(yáng)性率為38.2%(21/55)，顯著低于正常腦組織的80%(8/10)(P= 0.036)。p57kip2蛋白表達(dá)在低度惡性(Ⅰ-Ⅱ級(jí))組顯著高于高度惡性(Ⅲ-Ⅳ級(jí))組(P=0.029)，生存時(shí)間≥2年組顯著高于<2年組(P=0.032)。腦膠質(zhì)瘤中p21cip1蛋白陽(yáng)性率為60.0%(33/55)，與正常腦組織的90.0%(9/10)相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.143)。p21cip1蛋白表達(dá)在高度惡性(Ⅲ-Ⅳ級(jí))組顯著低于低度惡性(Ⅰ-Ⅱ級(jí))組(P=0.047)，生存時(shí)間<2年組顯著低于≥2年組(P=0.002)。p57kip2蛋白的表達(dá)與p21cip1蛋白的表達(dá)存在正相關(guān)(rs=0.354，P=0.008)。結(jié)論 p57kip2蛋白和p21cip1蛋白在腦膠質(zhì)瘤中存在異常表達(dá)，p57kip2蛋白和p21cip1蛋白的表達(dá)程度與腦膠質(zhì)瘤的分化程度、預(yù)后相關(guān)。

【關(guān)鍵詞】  p57kip2蛋白 p21cip1蛋白 膠質(zhì)瘤 免疫組織化學(xué)

　　ABSTRACT: Objective  To explore the expressions of p57kip2 and p21cip1 in human gliomas and their clinical significance. Methods  P57kip2 and p21cip1 were detected by SP immunohistochemical technique in 55 human glioma and 10 normal brain tissues. Results  Expression rate of p57kip2 protein in human glioma was 38.2%(21/55), which was significantly lower than that in normal brain tissues 80%(8/10) (P=0.036). P57kip2 expression in low malignance group (Ⅰ-Ⅱ grade) was significantly higher than that in high malignance group (Ⅲ-Ⅳ grade) (P=0.029) and in survival time ≥2 years group was significantly higher than that in <2 years group (P=0.032). Expression rate of p21cip1 protein in human glioma was 60.0 % (33/55), not significantly lower than that in normal brain tissues 90.0% (9/10) (P=0.143). P21cip1 expression in high malignance group (Ⅲ-Ⅳ grade) was significantly lower than that in low malignance group (Ⅰ-Ⅱ grade) (P=0.047) and in survival time<2 years group was significantly lower than that in ≥2 years group (P=0.002). There was a positive correlation between the expression of p57kip2 and p21cip1 (rs=0.354, P=0.008). Conclusion  The expression of p57kip2 protein and p21cip1 protein is deregulated in glioma, and its degree is correlated with the glioma differentiation and prognosis. The combined analysis of p57kip2 and p21cip1 expression is considered to be more reliable.

　　KEY WORDS: p57kip2 protein; p21cip1 protein; glioma; immunohistochemistry

　　近來(lái)研究表明，細(xì)胞周期調(diào)控異常與細(xì)胞癌變密切相關(guān)，二者的關(guān)系是腫瘤學(xué)研究的熱點(diǎn)問(wèn)題之一［1］。細(xì)胞周期調(diào)控系統(tǒng)由細(xì)胞周期蛋白(cyclin)、細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶(cyclin-dependent kinase, CDK)和CDK抑制因子(cdk inhibitor, CKI)組成。Cyclin與CDK以Cyclin-CDK復(fù)合物的形式發(fā)揮作用，CKI能競(jìng)爭(zhēng)性地與CDK結(jié)合，抑制其活性，從而調(diào)整細(xì)胞周期。新近發(fā)現(xiàn)的p57kip2為細(xì)胞周期調(diào)控因子CKIs家族的新成員，是細(xì)胞周期G1/S期的重要調(diào)控因子，與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)［2-4］。但p57kip2蛋白的表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤的關(guān)系以及p57kip2蛋白與p21cip1蛋白在腦膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展中的關(guān)系目前尚不清楚。本文應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)，探討p57kip2、p21cip1在腦膠質(zhì)瘤組織和正常腦組織中以及不同生存期的腦膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)和意義。

　　1  材料與方法

　　1.1  材料 高級(jí)職稱(chēng)論文發(fā)表

　　55例腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本為西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院2002-2004年手術(shù)存檔石蠟標(biāo)本，術(shù)后均經(jīng)病理診斷證實(shí)為腦膠質(zhì)瘤，其中星形細(xì)胞瘤42例，多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤6例，少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤5例，室管膜瘤2例。病例中男28例，女27例，年齡4-71歲，平均40.1歲。生存時(shí)間≥2年24例，<2年31例。根據(jù)2000年修改的WHO神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)所有腫瘤進(jìn)行組織學(xué)分類(lèi)和分級(jí)。其中，Ⅰ級(jí)12例，Ⅱ級(jí)17例，Ⅲ級(jí)18例，Ⅳ級(jí)8例。另10例正常對(duì)照腦組織取自我院因顱腦損傷行內(nèi)減壓術(shù)的患者，男女各5例，年齡10-65歲，平均36.5歲。所有患者均未經(jīng)過(guò)放療或化療。鼠抗人p57kip2單克隆抗體(NeoMarkers公司，1∶400)、鼠抗人p21cip1單克隆抗體(NeoMarkers公司，1∶100)、廣譜SP試劑盒購(gòu)自深圳晶美生物技術(shù)有限公司。

　　1.2  免疫組化染色

　　采用鏈霉素抗生物素-過(guò)氧化物酶法(SP法)檢測(cè)蛋白表達(dá)。每次實(shí)驗(yàn)均以PBS代替一抗作為空白對(duì)照，陽(yáng)性對(duì)照片由試劑公司提供。實(shí)驗(yàn)操作按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

　　1.3  觀察測(cè)定方法
 
　　p57kip2蛋白和p21cip1蛋白均以胞核染色為棕褐色顆粒者為陽(yáng)性細(xì)胞。400倍顯微鏡下每張載玻片計(jì)數(shù)500個(gè)細(xì)胞，依據(jù)染色陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比：<10%為陰性(-)；10%-25%為弱陽(yáng)性(+)；26%-50%為陽(yáng)性(��)；>50%為強(qiáng)陽(yáng)性(��)。

　　1.4  統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

　　應(yīng)用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。用卡方檢驗(yàn)、校正卡方檢驗(yàn)及Spearman等級(jí)相關(guān)分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。