淺析水產品中多種喹諾酮類藥物殘留量檢測方法

【內容摘要】：隨著社會的不斷發展，人們生活水平的不斷提升，食品安全問題愈來愈受到人們的注重，因此采取了很多方法來保障食品安全。漁藥殘留問題已經成為了很多國家迫切需要處理的問題，同時這也關乎著普通民眾的食品安全健康。本文從漁用獸藥殘留的來源和危害程度入手，分析具體的殘留量檢測方法和手段。
【關鍵詞】: 水產品 喹諾酮藥物殘留 檢測方法
0 引言
喹諾酮類藥物，是目前發展非�？焖伲�進行人工合成的人畜共同使用的抗生素類藥物，因為其擁有廣譜，有效等其他方面的優勢，不但能夠對人們的不同感染癥進行診治，而且目前普遍使用在畜禽診治，以及水產品養殖業等方面。但是這種藥物，一旦進入動物體內，就可以快速的把血液擴散到組織中，使得動物組織中出現非常高濃度的藥物殘留。本文通過具體的分析，介紹一些喹諾酮藥物殘留檢測方法。
1 漁用獸藥殘留的來源與危害
因為我國的國土面積遼闊，水產資源非常豐富，近些年來在國家政策的積極支持下，水產品養殖業得到迅猛發展，因此必須對原料來源的管理進行更深層次的強化和提升。不管是進行純自然捕撈還是進行人工養殖，或多或少的都會遭遇到農藥殘留，以及其他方面的情況，具體來看，涵蓋以下內容：首先，純自然捕撈水產品，這盡管沒有出現漁藥投放的情況，但是環境的污染在隱形之中給水產品帶來一定的程度的污染；其次在水產品養殖過程中，如果沒有根據藥品說明書中的規定進行嚴格的操作，依靠自身的經驗來操作，由于漁民自身能力的不足，匱乏對水產養殖，以及藥物使用方面等方面的掌握，出現亂用藥， 亂投藥以及其他不科學的行為，進而使得藥物在水產品體內殘留超出正常水平。即使漁藥的使用能夠在一定程度上避免水產品病害的擴延，在一定程度上防止經濟損失的過大。然而這些原因的結果就是，大劑量的藥物在水產品體內進行殘留，如果人們進行長期的食用，在人們的體內就會急劇毒素，進而讓人們的免疫系統等方面出現問題，打破了人體正常的腸道菌群環境，嚴重的話，還會直接威脅人們的生命安全。
2 高效液相色譜法法檢測水產品中多種喹諾酮類藥物殘留量
2.1 高效液相色譜法的檢測原理
高效液相色譜法主要用液體作為流動相，按照吸附，分配， 以及篩析不同原理進行樣品分離，其固定相種類非常繁多。在高壓作用下，流動相和樣品在色譜柱中被頻繁的進行分配，
不同的組別被隔離，最終通過檢測器測出含量，具體的流程圖如圖1 所示。
2.2 檢測試驗
2.2.1 設備與試劑
其中設備主要有：高效液相色譜儀：Waters2478 高效液相色譜儀，具有雙泵，美國 Waters 公司。 均質機：A-88 型組織搗碎機，北京平利洋醫療設備有限公司。 離心機：TDL80-2B 型低速臺式離心機，安徽松陽醫療設備有限公司。 LD4-8 型臺式離心機，鄭州醫用離心機廠。 TGL-16G 型高速臺式離心機，長沙慈恩醫療設備有限公司。 旋轉蒸發器：北京天壇科學儀器廠。循環水式多用真空泵：安徽旋洋貿易股份有限公司。振蕩器：XH-C 型旋渦混合器，江西省金壇市醫療機器廠。電子天平：感量0.0001g 和 0.01g 各一臺，北京安陽有限公司。 pH 計： 北京安陽有限公司。磁力加熱攪拌器：上海理達儀器廠。 去離子水制取裝置：Milly-Q Academic，上海百維生物科技有限公司。 固相萃取裝置：美國奧泰科技有限公司。
其中試劑主要有：恩諾沙星，諾氟沙星，氟甲喹標準品：純度大于99.0%，英國Dr.Ehrenstofer 公司；乙腈、甲醇都是色譜純，美國 Tedia 公司；鹽酸，氫氧化鈉等都為分析純，安徽安慶市溪坊化工廠。
2.2.2 溶液配制
按照具體檢測的藥物特點，一般情況下，標準溶液的配制方法基本如下：科學的稱量諾氟沙星，氧氟沙星標準品10.0 mg，汲取0.1 mol/L HCl 溶液 10 mL，接著將乙腈放置在100 mL 容量瓶中，配成濃度為100μg/mL 的標準溶液；科學的稱量恩諾沙星，環丙沙星標準品10.0 mg，用甲醇放置在100 mL 棕色容量瓶中，溶液濃度為100μg/mL ；科學的稱量噁喹酸，氟甲喹標準品10.0 mg，使用0.1 mol/L NaOH 溶液10 mL 進行溶解，然后再用乙腈放置在100 mL 棕色容量瓶中，溶液濃度為 100 μg/ mL。一般將配置的溶液放置在4 ℃冰箱中進行儲存，保存期不超過3 個月。
2.2.3 色譜條件
色譜柱：Zorbax Elipse XDB-C18柱，150 mm×4.6 mm（i.d.）； 流動相：A ：0.01 mol/L
四丁基溴化銨（pH 3.0）+ 乙腈=94 ＋ 6（V/V），B ：乙腈； 梯度洗脫程序具體見表1，平衡時
間5min ；流速：0.9 mL/min ；檢測波長：程序具體見表2 ； 柱溫：35℃ ；進樣量：20 μL。
2.2.4 樣品制備，提取與凈化
在整個檢測過程中，首先將樣品進行制備：魚類樣品去除骨頭和皮，選取肌肉部分；甲殼類選取能夠食用的部分，將其切成小塊，充分勻漿，放置在-18℃下進行冷凍儲存。
其次是樣品的提取和凈化：稱量相同樣品大約5 g，將其放置在50 mL 塑料離心管，汲取20 mL 酸化乙腈，然后接著加入10 g 無水硫酸鈉，使用渦旋振蕩器在2500 r/min 高速振蕩0.9 min-1.5 min 后，2500 r/ min 離心5min，選取上清液轉移到分液漏斗，剩余的雜物使用20 mL 酸化乙腈進行再次提取2 次，合并上清液放在分液漏斗中。然后向分液漏斗中加入60 mL 正己烷溶液，同時進行充分振搖，靜置分層。下層轉移至梨形瓶中， 40℃水浴減壓蒸發到干。把C18 固相萃取柱分別使用3 mL 甲醇，3 mL 水等預淋洗活化。使用4 mL 的磷酸鹽緩沖液溶解梨形瓶中的雜物，轉向提取液到柱上，過柱。流速控制在每秒一滴。重復兩次，分別過柱。在過柱之后，使用3 mL 水進行沖洗； 然后再使用5 mL 洗脫液進行洗脫。搜集完洗脫液，在50℃下使用N2 進行吹干，使用1 mL 流動相定容，在經過0.22 μm 微孔濾膜后，將濾液進行檢測。
2.3 結果
經過上述實驗的表明，在液相色譜分析條件的確定上，樣品前處理方法的確定上，以及方法回收率和精密度上，以及方法的實際應用上，都完全符合制定殘留分析標準的技術需求。
3 結束語
綜上所述，本文通過對水產品中多種喹諾酮類藥物殘留量進行檢測方法進行研究，在上文的試驗當中，通過對色譜柱的選擇，確定了氧氟沙星等激發和發射波長的確定，另外使用有效的液相色譜熒光檢測方法額檢測，對各種不同的藥物進行測定。通過試驗可以得出，樣品前處理方法簡單，科學，同時上文提到的檢測方法能夠很快的檢測出不同藥物類別的殘留量，不但節省費用，還省下了時間。
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